Espressione genica e stato fisiologico di Listeria monocytogenes Scott A in relazione all'alta pressione di omogeneizzazione

Nel lavoro sperimentale presentato in questa tesi di laurea, è stato valutato l’effetto delle alte pressioni di omogeneizzazione applicate a diversi livelli e ripetute o meno per più cicli su una sospensione cellulare di Listeria monocytogenes, in termini di vitalità, stato fisiologico delle diverse frazioni della popolazione di cellule ed espressione di geni coinvolti nella patogenicità (flaA, bsh, inlA), nella risposta generale allo stress (opuCA e cspL) e nei meccanismi di trasporto dei nutrienti (opuCA). I livelli di pressione applicati hanno mostrato che L. monocytogenes, pur mantenendo elevati carichi cellulari, mette in atto, all’aumentare della pressione, una modulazione dell’espressione di geni coinvolti sia nella virulenza (flaA, bsh, inlA) che nella risposta generica agli stress (opuCA, cspL). In particolare, trattamenti a 25 e 100 MPa hanno portato ad una sostanziale stimolazione della patogenicità. Diversamente, i trattamenti iperbarici a 100 MPa ripetuti, determinano una sostanziale diminuzione della virulenza cellulare. Per quanto riguarda i geni coinvolti nei meccanismi di risposta generale, è stata riscontrata una sottoespressione del gene cspL e una sovraespressione del gene opuCA. Grazie all’utilizzo della citometria di flusso, sono stati inoltre evidenziati i cambiamenti fisiologici delle cellule di L. monocytogenes quando sottoposte a trattamenti iperbarici crescenti. Questi dati forniscono inoltre indicazioni interessanti per il trasferimento a livello industriale di questa tecnologia. Infatti, i dati di espressione genica indicano chiaramente che occorre applicare pressioni superiori a 100 MPa per più cicli per evitare di incrementare la virulenza del batterio.